蛋白質濃度計算器

分類：生物學
- 2025年04月03日
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典型值範圍從 0.5 到 2.0
標準比色皿的光路長度為 1 cm
如果樣品在測量前已稀釋 (例如，5 = 1:5稀釋)

使用280 nm（A280）吸光度來測定蛋白質濃度是根據比爾-朗伯定律進行的：

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

其中：

  • \( C \) = 蛋白質濃度（mg/mL）
  • \( A \) = 280 nm的吸光度
  • \( \epsilon \) = 滅絕係數（L·g⁻¹·cm⁻¹）
  • \( l \) = 比色皿的光程（cm）

什麼是蛋白質濃度計算器？

蛋白質濃度計算器幫助使用不同的方法來確定蛋白質濃度，包括：

  • 280 nm的吸光度（A280）：基於芳香族氨基酸的快速且非破壞性的方法。
  • 布拉德福德測定法：使用染料結合的比色法。
  • BCA（雙吡啶醇酸）測定法：依賴於銅還原和比色檢測的方法。
  • 洛瑞測定法：使用蛋白質-銅相互作用的成熟方法。

如何使用計算器

按照以下步驟計算蛋白質濃度：

  • 選擇測量方法（A280、布拉德福德、BCA或洛瑞）。
  • 輸入所需的值，如吸光度、稀釋因子和滅絕係數（如有需要）。
  • 如果使用標準曲線方法（布拉德福德、BCA或洛瑞），請輸入曲線參數。
  • 點擊“計算”按鈕以獲得濃度結果。

使用計算器的好處

  • 通過自動化濃度計算節省時間。
  • 支持多種測量方法以提供靈活性。
  • 包括稀釋計算器以準備特定濃度。
  • 減少手動計算中的人為錯誤。

常見問題

1. 吸光度（A280）方法的準確性如何？

A280方法對於純蛋白質通常是準確的，但可能會受到核酸等污染物的影響。

2. 我可以對所有蛋白質使用布拉德福德測定法嗎？

布拉德福德測定法對大多數蛋白質效果良好，但根據蛋白質組成可能會給出變化的結果。

3. BCA測定法的優勢是什麼？

BCA方法與洗滌劑的相容性更好，且比布拉德福德具有更寬的線性範圍。

4. 我如何選擇A280的正確滅絕係數？

使用已發表的已知蛋白質的值，或根據氨基酸組成計算滅絕係數。

5. 為什麼我需要稀釋因子？

如果您的樣品在測量前已被稀釋，則必須將計算出的濃度乘以稀釋因子以獲得正確的最終濃度。